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本生快訊:免疫印跡(Western blotting)檢測服務(wù)
服務(wù)內(nèi)容:
從動物細(xì)胞、人或者動物組織、細(xì)菌、植物樣品中提取蛋白樣品。
對蛋白樣品進(jìn)行半定量分析
western檢測
電泳:聚丙烯酰氨凝膠電泳分離蛋白樣品
轉(zhuǎn)膜:濕轉(zhuǎn)
抗體孵育:使用抗體檢測膜上的特定蛋白
信號收集:采用ECL發(fā)光法和chemidoc MP進(jìn)行信號收集分析
樣品要求:
細(xì)胞>1*107,組織>30mg,菌體濕重>10mg,植物>100mg
說明 1) 要求做10孔膠,不足9個樣本算一張膜
2) 要求做15孔膠,不足12個樣本算一張膜
3) 以10孔膠為例: 7個樣品,1個蛋白抗體,算1張膜;9個樣品,1個蛋白抗體,算2張膜; 7個樣品,2個蛋白抗體,算2張膜;9個樣品,2個蛋白抗體,算4張膜。
客戶提供:
新鮮或者正確保存的樣品(按照我們的要求提供,參照下方注意事項)
灰度值分析(可選)
服務(wù)說明
提供的蛋白量與目的待檢測的蛋白數(shù)量有關(guān),蛋白數(shù)量增加相應(yīng)的樣品量也要增加;
胞漿蛋白和胞核蛋白樣品來源為:哺乳動物細(xì)胞。
每張膜樣品數(shù)量為1-8個(10孔膠)或者1-12個(15孔膠),不足一張膜的按一張膜收取;
以10孔膠為例:
7個樣品,1個蛋白抗體,算1張膜;9個樣品,1個蛋白抗體,算2張膜;
7個樣品,2個蛋白抗體,算2張膜;9個樣品,2個蛋白抗體,算4張膜;
如客戶有特殊上樣要求,按涉及的實際膜數(shù)量進(jìn)行計算。
請客戶提供有質(zhì)量保證的一抗。抗體的使用量通過預(yù)實驗后進(jìn)行確認(rèn),不回收利用一抗。
建議提供蛋白的陽性對照品;
免費提供普通內(nèi)參:beta-actin,GAPDH,beta-tubulin;
雙方簽訂合同后,收取70%的款項后啟動實驗;
特殊要求請咨詢。
注意事項:
對于細(xì)胞和一些微生物樣本,可去除培養(yǎng)基后,加裂解液制備蛋白樣品;若未能及時制備蛋白樣品,去除培養(yǎng)基后,將其液氮速凍后保存于-80℃(約一個月)或保存于液氮(約三個月);運輸時,樣本(含培養(yǎng)基)加冰袋,保持培養(yǎng)基低溫但不結(jié)冰,或者樣本去除培養(yǎng)基后加干冰。
提取蛋白的樣本最好是新鮮的,同時,以盡可能地提取有效蛋白為準(zhǔn)則;樣本需避免反復(fù)凍融。
所有樣本均不建議保存于-20℃。-20℃時,組織、細(xì)胞內(nèi)的水會結(jié)晶,細(xì)胞活性和組織微觀結(jié)構(gòu)會受到傷害,生物大分子受到組織、細(xì)胞內(nèi)多種因素的影響,穩(wěn)定性可能會明顯降低,但部分純化的大分子可以短中期保存。
-80℃保存條件時,樣本內(nèi)的生化反應(yīng)減弱,可中期保持組織細(xì)胞內(nèi)大分子的穩(wěn)定性,短期保持細(xì)胞活性和組織微觀結(jié)構(gòu);
液氮保存可長期保持組織細(xì)胞內(nèi)大分子的穩(wěn)定性、細(xì)胞活性和組織微觀結(jié)構(gòu);液氮保存時,盛裝樣本的Ep管管口需用封口膜密封,防止管口爆開造成交叉污染。
抗體本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護(hù)和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創(chuàng)美好的未來。
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