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以下是關(guān)于人凋亡蛋白酶激活因子1(ICAD)ELISA試劑盒的實驗使用說明綜合整理:
BS-0223 人凋亡蛋白酶激活因子1(ICAD)ELISA試劑盒
一、實驗原理
采用雙抗體夾心法(ABC-ELISA法)檢測樣本中ICAD濃度。通過標(biāo)準(zhǔn)品與樣本OD值的比例關(guān)系計算濃度。
二、試劑盒組成
標(biāo)準(zhǔn)品?:400ng/ml或2700ng/L(需用稀釋液復(fù)溶)
酶標(biāo)包被板?:96孔或48孔配置
顯色劑?:底物A/B液
洗滌液?:20×濃縮液需1:20稀釋
終止液?:用于終止反應(yīng)
三、操作步驟
樣本準(zhǔn)備?
血清/血漿:離心后取上清,避免反復(fù)凍融。
組織勻漿:需充分混勻。
標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶?
凍干標(biāo)準(zhǔn)品加0.5ml稀釋液,靜置10分鐘溶解。
加樣與溫育?
標(biāo)準(zhǔn)品孔加50μL不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品,樣本孔加10μL樣本+40μL稀釋液。
每孔加入HRP標(biāo)記抗體100μL,37℃孵育60分鐘。
洗滌?
用洗滌液洗板5次,拍干。
顯色與終止?
加底物A/B各50μL,37℃避光孵育15分鐘。
加終止液50μL,15分鐘內(nèi)測450nm OD值。
四、注意事項
保存條件?:試劑盒2-8℃保存,使用前室溫平衡20分鐘。
質(zhì)量控制?:建議標(biāo)準(zhǔn)品和樣本做雙份檢測。
干擾因素?:避免細(xì)菌污染或反復(fù)凍融。
五、結(jié)果計算
以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)、OD值為縱坐標(biāo)繪制曲線,通過回歸方程計算樣本濃度。
如需具體試劑盒的完整說明書,可參考廠商提供的詳細(xì)文檔,以上資料僅供參考。
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