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本生闡述:如何區(qū)分ELISA實(shí)驗(yàn)
更新時(shí)間:2022-09-27瀏覽:1136次

  本生闡述:如何區(qū)分ELISA實(shí)驗(yàn)


  近年來(lái),ELISA試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)得到了廣泛的應(yīng)用,ELISA試劑盒根據(jù)試劑的來(lái)源和標(biāo)本的情況以及檢測(cè)的具體條件,又分為雙抗夾心法、間接法、競(jìng)爭(zhēng)法等幾種類型。下面就由本生生物小編給大家闡述下:

  那么,這幾種類型分別適用于哪些實(shí)驗(yàn)?

  1、雙抗體夾心法測(cè)抗原:雙抗體夾心法是檢測(cè)抗原常用的方法,適用于測(cè)定二價(jià)或二價(jià)以上的大分子抗原,但不適用于測(cè)定半抗原及小分子單價(jià)抗原,因其不能形成兩位點(diǎn)夾心。

  2、雙抗原夾心法測(cè)抗體:反應(yīng)模式與雙抗體夾心法類似。用特異性抗原進(jìn)行包被和制備酶結(jié)合物,以檢測(cè)相應(yīng)的抗體。與間接法測(cè)抗體的不同之處為以酶標(biāo)抗原代替酶標(biāo)抗抗體。此法中受檢標(biāo)本不需稀釋,可直接用于測(cè)定,因此其敏感度相對(duì)高于間接法。乙肝標(biāo)志物中抗HBs的檢測(cè)常采用本法。本法關(guān)鍵在于酶標(biāo)抗原的制備,應(yīng)根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)的不同,尋找合適的標(biāo)記方法。

  3、間接法:是檢測(cè)抗體常用的方法,本法主要用于對(duì)病原體抗體的檢測(cè)而進(jìn)行傳染病的診斷。

  4、競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗體:當(dāng)抗原材料中的干擾物質(zhì)不易除去,或不易得到足夠的純化抗原時(shí),可用此法檢測(cè)特異性抗體。其原理為標(biāo)本中的抗體和一定量的酶標(biāo)抗體競(jìng)爭(zhēng)與固相抗原結(jié)合??笻Be的檢測(cè)一般采用此法。

  5、競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗原:小分子抗原或半抗原因缺乏可作夾心法的兩個(gè)以上的位點(diǎn),因此不能用雙抗體夾心法進(jìn)行測(cè)定,可以采用競(jìng)爭(zhēng)法模式。其原理是標(biāo)本中的抗原和一定量的酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)與固相抗體結(jié)合。標(biāo)本中抗原量含量愈多,結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗原愈少,最后的顯色也愈淺。小分子激素、藥物等ELISA測(cè)定多用此法。

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